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徠卡顯微鏡在分離細胞過程實驗中有什么作用

更新時間:2022-10-13      點擊次數:985
  徠卡顯微鏡解決色差,因為透鏡的焦距與透鏡區的規范化電位及線圈電流有關。當電子柬本身的能量有離散或透鏡區靜電位有起伏時,都將導致規范化電位的改變。這種電位的變化,或者透鏡的激勵電流不穩.又都會引起焦距的變化。它們將使軸上物點受到不同的偏轉,zui終與軸相交在不同處。在理想像平面中傷點與軸有了橫向偏離,從而形成模糊因斑。這種偏離稱為中心色差。像平面或物平面中的色差模糊圓半徑分別為:為減小色差,在設計透鏡時應使c盡量小,因為色差系數c‘和極靴結構及透鏡的激勵情況有關。
 
  有聚光鏡的顯微鏡則可將聚光鏡作上下移動使其亮度適中,另外也可以改變可變光闡的孔徑以達到適中9b亮度。如果光線太陽時,則可將聚光鏡作適當的向上升,可變光鬧的孔徑作適當的放大。如果光線太強則可將聚光鏡作適當的下降,可交光閏的孔徑作適當的減小。假如在這種情況下還感到刺眼,那末可選用適當的濾光片放置在聚光鏡下的托架上。這柞就能獲得使你滿意的亮度。當然在調節聚光鏡的上下位置利可變光閱的孔徑大小以及選用適合的濾光片,那是要經過一定時期的實踐而取得經驗的。
 
  徠卡顯微鏡一個非常重要的問題是在取材和分離細胞過程,冰凍干燥和樹脂包埋(FD)后冰凍超簿團片后,冰凍干燥后細跑各部位65元素成分含量中必須處理十分仔細,絕不能損傷待觀察分析的細胞。因為作x線微區分析不但步驟繁多,而且成本甚高,如果經過長時間及多步驟的處理后,所分析的細胞是受損傷的細胞或死細胞,得出錯誤的結論是非常遺憾的。如經過膠元酶處理分離出的心肌細胞有兩種形態,一種是長桿狀,另一種是圓形。后者是在細胞分離過程中受損傷的瀕死細胞。
 
  可將肌纖維放在一特制的架上,使該肌纖維收縮達到某時相需要固定時,立即啟動噴咀,使液態丙烷向肌纖維噴射,使之淬冷固定。然后再將肌纖維連同架子取出投入液氮中。如果固定血細胞或分離的細胞,首先低速離心使細胞集中,將細胞轉移到一個導熱性能良好的銀質小管中、將該小管放入液態丙烷中獰冷固定。實驗室固定大鼠胰腺時,先將兩鋼塊用液氦(或液氮)預冷,用鉗夾住兩銅塊將其放在胰腺前后,使姨腺淬冷固定。組織或細胞淬冷固定后轉移到液氮中可長期保存。
 
  除目前zui推崇的冰凍超薄切片法外,在這里再介紹一種科學家們用過的沉積技術。在進行分析前加入一種物質,使之與待分析的成份形成沉積物以固定它,然后分析該沉積物。例如,人們常用草酸鹽與焦銻酸鹽去沉積肌細胞中的ca。前者對胞漿中低濃度的ca敏感性不夠高;焦銻吱鹽的敏感性高些,可與腦漿中游離ca形成電子致密的沉積物,但焦銻酸鹽與鈉、錳、鋇、鐵也形成沉積物,特異性較差。標本制備過程類似于普通透射電鏡超薄切片標本的制備,不同之處在于固定前3%焦銻酸鉀固定6小時,在染色的肌肉超薄切片上,在每個肌節的A帶和2帶的中線可見黑色沉淀物、再用未染色的切片做X射線微區分析。曾用二氨基聯苯胺四鹽酸(DAB)去沉淀含血紅素的物質等等。這種組化的沉淀反應與x射線微區分橋聯合應用在不具備冰凍超薄切片條件的實驗室可考慮采用。根據待分析元素的峰高可做半定量。
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